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NEWS人胸腺活化调节趋化因子TARC ELISA试剂盒使用手册 - ag尊龙凯时
来源:高彬时 日期:2025-03-09ag尊龙凯时研发的本试剂盒专用于科学研究,严禁用于医学诊断。本文介绍胸腺活化调节趋化因子(TARC)的Elisa试剂盒及其操作说明。
此试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)。操作时,首先在已包被adropin(AD)抗体的微孔中依次加入生物样本、标准品及HRP标记的检测抗体。经过温育后彻底洗涤,再使用底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化下,TMB由无色转变为蓝色,随后在酸性条件下转变为最终的黄色。生成的颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度成正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并计算样品浓度。
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,操作过程中避免细胞刺激。收集血液后,进行3000转/分钟离心10分钟,迅速且小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转/分钟离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:进行3000转/分钟离心10分钟,去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合捣碎后,进行3000转/分钟离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本未能及时检测,请按一次用量分装,冻结于-20℃以避免反复冻融。样本在室温下解冻时要确保充分均匀。
此试剂盒的组成中,标准品浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
20×洗涤缓冲液按1:20比例稀释,方法为将1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。
通过Excel图表绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,从而形成线性回归曲线。按曲线方程计算样品浓度。
免责声明:使用ag尊龙凯时试剂盒时,请遵循相关操作规范,以确保实验结果的准确性和可靠性。
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